Medium Knudson untuk orkid

Medium Knudson ialah medium nutrien tiruan yang dibangunkan pada tahun 1946 oleh ahli botani Amerika Lewis knudson untuk menumbuhkan benih orkid dan menggalakkan pertumbuhan dalam keadaan steril. Ia adalah salah satu media yang paling banyak digunakan untuk menanam orkid secara in vitro dan popular untuk aplikasi makmal dan rumah.

Apakah medium knudson?

Orkid secara semula jadi tumbuh dalam simbiosis dengan kulat mikoriza, yang membekalkan nutrien penting. Walau bagaimanapun, menghasilkan semula simbiosis ini dalam keadaan makmal adalah mustahil. Medium Knudson telah dibangunkan sebagai pengganti yang kaya dengan nutrien yang membekalkan semua elemen penting yang diperlukan untuk percambahan benih dan pertumbuhan anak benih.

Komposisi medium knudson

Formula standard termasuk:

• Gula: sumber tenaga utama.
• garam mineral:
  • Kalium nitrat (kno₃) – sumber nitrogen.
  • Magnesium sulfat (mgso₄) – membekalkan magnesium dan sulfur.
  • Kalium dihidrogen fosfat (kh₂po₄) – membekalkan fosforus dan kalium.
  • Kalsium klorida (cacl₂) – sumber kalsium.
• Vitamin:
  • Asid nikotinik, tiamin, dan piridoksin untuk mengaktifkan proses metabolik.
  • Besi, zink, mangan dan unsur lain yang penting untuk pembangunan tisu.
  • Agar-agar untuk mencipta medium pepejal, menghalang benih atau anak benih daripada tenggelam.
• Unsur surih:
• Ejen gel:

Kelebihan menggunakan medium knudson

1. Merangsang percambahan benih:
   • Menyediakan semua nutrien yang diperlukan untuk percambahan, menggantikan keperluan untuk simbiosis kulat.
2. Persekitaran steril:
   • Mencipta keadaan ideal untuk pertumbuhan tanpa risiko pencemaran bakteria atau kulat.
3. Keadaan pertumbuhan optimum:
   • Menyokong perkembangan anak benih sehingga mereka bersedia untuk dipindahkan ke dalam substrat.
4. Sesuai untuk spesies orkid yang berbeza:
   • Formula boleh dilaraskan untuk memenuhi keperluan khusus jenis orkid yang berbeza.

Aplikasi medium knudson

1. Percambahan benih:
   • Biji orkid disterilkan (biasanya dengan larutan natrium hipoklorit).
   • Biji benih steril diletakkan di atas permukaan medium nutrien dalam cawan petri atau tabung uji.
2. Pertumbuhan anak benih:
   • Medium menyokong perkembangan anak benih sehingga daun dan sistem akar awal muncul.
3. Pemindahan ke dalam substrat:
   • Setelah anak benih mencapai saiz yang sesuai, ia dipindahkan ke dalam substrat yang sesuai (cth, kulit kayu, lumut sphagnum).

Bagaimana untuk menyediakan medium knudson?

Bahan-bahan (contoh untuk 1 liter):

• Agar-agar: 10 g
• Gula: 20 g
• Kh₂po₄: 250 mg
• Mgso₄·7h₂o: 250 mg
• Cacl₂·2h₂o: 250 mg
• Kno₃: 500 mg
• Vitamin (tiamin, asid nikotinik): 1 mg setiap satu
• Unsur mikro (cth, feso₄): 1–2 mg
• Air suling: 1 l

Langkah-langkah:

1. Larutkan semua komponen dalam air suling.
2. Masukkan agar-agar dan panaskan untuk larut sepenuhnya.
3. Tuangkan larutan ke dalam bekas steril (piring petri, tabung uji).
4. Sterilkan medium dalam autoklaf atau mandi air (15 minit pada suhu 121°c).
5. Sejukkan medium untuk membolehkan ia menjadi pejal.

Petua untuk menggunakan medium knudson

1. Mengekalkan kemandulan:
   • Bekerja dalam keadaan steril untuk mengelakkan pencemaran.
2. Pantau suhu:
   • Simpan kultur pada suhu +20–25°c.
3. Berikan cahaya yang mencukupi:
   • Pastikan pencahayaan lembut dan tersebar selama 12–14 jam setiap hari.
4. Pemindahan:
   • Pindahkan anak benih ke substrat apabila ia cukup besar untuk pertumbuhan bebas.

Kesimpulan

Medium Knudson ialah alat kritikal untuk berjaya menumbuhkan benih orkid dan memupuk anak benih yang sihat. Ia menyediakan keseimbangan sempurna nutrien untuk pertumbuhan, menghapuskan keperluan untuk simbiosis kulat. Medium ini sesuai untuk membiak spesies orkid yang jarang ditemui dan hiasan, sama ada di makmal atau di rumah.